更新時(shí)間:2023-10-26
非洲豬瘟病毒(ASFV)核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品Promocell C-23020 Fibroblast Growth Medium 2, 成纖維細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml分子篩4A( beads,8-12 mesh)Molecular sieves, 4 Åbeads,8-12 mesh黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR分子篩, 5 Å(20-40目,氣相、液相色譜柱)Molecula
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:非洲豬瘟病毒(ASFV)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:48T
編號:BH-P97031
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
DCN Others Human Decorin / DCN / SLRR1B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瑞替加濱RetigabineHPLC>95%,
腎小管上皮細(xì)胞Many types of cells(1ml)Ribavirin>99%,BR
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ()RibavirinHPLC>98%,
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D3Ribostamycin Sulfate≥630µg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
GLC-82-TK細(xì)胞,肺腺癌細(xì)胞(轉(zhuǎn)染TK基因的GLC-82細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-1細(xì)胞 CL-0066COLO 205(結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2利福布丁Rifabutin >97%,BR
PBK Others Human PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 芍藥苷()>98%,分析Paeoniflorin
少突膠質(zhì)前體細(xì)胞cDNAHOPC cDNA芍藥苷(40%)≥40%Paeoniflorin
MCF-7細(xì)胞,癌細(xì)胞 肺鱗癌細(xì)胞,LTEP-s細(xì)胞 滑膜細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)芍藥苷(50%)≥50%,BRPaeoniflorin
犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild芍藥苷(90%)≥90%Paeoniflorin
PLAT Others Human tPAβ 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-(4-甲氧羰基苯基)-10,15,2-三苯基卟吩(>90.0%(HPLC))>90.0%(HPLC)5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin
非洲豬瘟病毒(ASFV)核酸檢測試劑盒tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F33,3',4,4'-聯(lián)本四,英文名或英文縮寫:DAB,級別:BR,85%,規(guī)格:100克
SGC-7901細(xì)胞,胃腺癌細(xì)胞 食管癌細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12](R)-(+)-叔丁基亞磺酰安 (R)-(+)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 19699-78-9
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5L-西代胱安基醋 L-SqLqNOCYSTINq 961-88-3
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 失水蘋果1,英文名或英文縮寫:MA,級別:CP,規(guī)格:25克
腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2150-25-4N,N-二甘酸 (BICINE)Bicine
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。