更新時(shí)間:2023-11-05
傘枝梨頭霉PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
傘枝梨頭霉PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格組成及試劑配制:
1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
傘枝梨頭霉PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
傘枝梨頭霉PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
DDX23 三磷酸腺苷依賴解旋酶DDX23抗體
DPPA5 多能發(fā)育相關(guān)基因5抗體
DDX3 三磷酸腺苷依賴解旋酶DDX3抗體
phospho-DDX3(Thr322) 磷酸化三磷酸腺苷依賴解旋酶DDX3抗體
Dymeclin 迪格弗-梅爾基奧爾-克勞森綜合征相關(guān)蛋白抗體
DUOXA2 雙氧化酶激活因子2抗體
DZIP3 RNA結(jié)合泛素連接酶DZIP3抗體
AKR1C1 二氫二醇脫氫酶1/2抗體
DAAM2 形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子2抗體
DOCK2 細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白2抗體
DOCK4 細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白4抗體
DOCK5 細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白5抗體
DEC-205/CD205/Ly75 淋巴細(xì)胞抗原75抗體
DIP13B DIP13β抗體
DLG5 胎盤和前列腺相關(guān)蛋白DLG5抗體
DOK7 接頭蛋白DOK7抗體
DMRT3 抗體特異性DMRT3蛋白抗體
Desmoglein 2 橋粒芯糖蛋白2抗體
DPP2 溶酶體蛋白酶DPP2抗體
Delta 4 Notch信號(hào)通路Delta樣配體4抗體
DLP1 動(dòng)力相關(guān)蛋白1抗體
DAAM1 形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體
phospho-Dnmt1(Tyr969) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體
phospho-DDX58 (Ser8) 磷酸化DDX58抗體
phospho-DDX58 (Thr170) 磷酸化DDX58抗體
phospho-Desmin (Thr16) 磷酸化結(jié)蛋白抗體
phospho-Desmin (Thr76 + Thr77) 磷酸化結(jié)蛋白抗體
Dmt1 二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
DRD2 多巴胺受體D2抗體
DRD1 多巴胺受體D1抗體
DRIP1 多巴胺受體相互作用蛋白1抗體
DAPK1 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體
DAPK2 凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體
DARPP32 多巴胺、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體
Phospho-DARPP32 (Thr34) 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體
Phospho-DARPP32 (Thr75) 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體
Phospho-Doublecortin (Ser128) 磷酸化雙皮質(zhì)素抗體
Phospho-Dab1 (Tyr220) 磷酸化Disabled 1抗體
Phospho-Dab1 (Tyr232) 磷酸化Disabled 1抗體
Phospho-Dab1 (Ser491) 磷酸化Disabled 1抗體
Doublecortin 雙皮質(zhì)素抗體
DOK2 D激酶衰減蛋白2抗體
Phospho-DOK2 (Tyr351) 磷酸化D激酶衰減蛋白2抗體
Phospho-DOK2 (Tyr299) 磷酸化D激酶衰減蛋白2抗體
Phospho-DOK2 (Tyr142) 磷酸化D激酶衰減蛋白2抗體
DBC1/deleted in bladder cancer 1 膀胱癌缺失基因1
Phospho-DBC1 (Tyr454) 磷酸化膀胱癌缺失基因1抗體
DRD4 多巴胺受體D4抗體
DP-I 橋粒斑蛋白1抗體
DP-II 橋粒斑蛋白2抗體
傘枝梨頭霉PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格DRD5 多巴胺受體D5抗體
dUTPase 脫氧三磷酸核苷水解酶抗體
DRD3 多巴胺受體D3抗體
DcR3 誘捕受體3抗體