更新時間:2023-11-08
粗球孢子菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)公司相關產品SV40T轉化臍靜脈內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1鈷粉(>99%,BR)>99%,BRCobaltous powder大鼠中腦縫神經細胞(腦脊)(RNr)(1×106)銅粉(>99.5%,BR)>99.5%,BRCopper powderCM-H040結腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL三亞乙基硫代1酰胺>98%,BRTriethyle
訂購信息:
產品名稱:粗球孢子菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
編號:BH-P97233
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
臍靜脈平滑肌細胞RNAHUVSMC miRNA5 μg己二酸二乙酯(>99.0%(GC))Diethyl Adipate>99.0%(GC)
大鼠海馬趾星形膠質細胞(RAh)(5×105)己二酸二異癸酯Diisodecyl Adipate
恒河猴腎細胞;LLC-MK2壬二酸雙(2-乙基己基)酯(>75.0%(GC))Bis(2-ethylhexyl) Azelate>75.0%(GC)
KM小鼠網織細胞肉瘤瘤株;LⅡ 小鼠腎上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL己二酸二異丙酯(>99.0%(GC))Diisopropyl Adipate>99.0%(GC)
MN-c, 小鼠皮質神經元 Mouse己二酸二丁酯(>99.0%(GC))Dibutyl Adipate>99.0%(GC)
CM-M037小鼠小腸隱窩上皮細胞*培養(yǎng)基100mL碳酸二苯酯(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Diphenyl Carbonate
TE-10細胞,食管癌細胞 腦膠質母細胞瘤細胞,TG-905細胞 家貓皮膚細胞;FCA-S1二芐基亞砜(>98.0%(GC))>98.0%(GC)Dibenzyl Sulfoxide
Calu-1(肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2乙二醇二苯(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Ethylene Glycol Diphenyl Ether
PTPRC Others Human CD45 細胞裂解液 (陽性對照) 十六碳酰胺(>95.0%(GC))>95.0%(GC)Hexadec*
小鼠前胃癌細胞;MFC()含量測定Pentoxifylline
粗球孢子菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)絨毛膜內皮細胞,英文名或英文縮寫:Rapamycin,級別:BR,85%,規(guī)格:2KU
胚腎細胞;293 Cells, low passage 心室肌細胞*培養(yǎng)基 100mL聯(lián)本酰 Bqnzil 134-81-6
肺成纖維細胞RNAHPF miRNA5 μg尿苷-5′-單嶙酸,英文名或英文縮寫:U 5′-P,級別:BR,98%,規(guī)格:50毫克
IGSF8 Others Human PGRL / IGSF8 細胞裂解液 (陽性對照) 正十三烷,英文名或英文縮寫:Tridecane,級別:SP,98.5%,規(guī)格:5克
小香豬皮膚細胞;SSC-S2MTT 250mg/500mg/1g Amresco分裝
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。